Stz

STZ 誘發(fā)糖尿病動(dòng)物模型原理如下:

STZ對(duì)一定種屬動(dòng)物的胰島β細(xì)胞有選擇性破壞作用，能誘發(fā)許多動(dòng)物產(chǎn)生糖尿病，一般采用大鼠和小鼠制造動(dòng)物模型。國(guó)外有學(xué)者報(bào)道選用雄性大鼠制造模型的成模率明顯高于雌性大鼠。1型糖尿病與2型糖尿病動(dòng)物模型的制備與STZ注射的劑量有關(guān)系：大劑量注射時(shí)，由于直接引起胰島β細(xì)胞的廣泛破壞，可造成1型糖尿病模型；而注射較少量STZ時(shí)，由于只是破壞一部分胰島β細(xì)胞的功能，造成外周組織對(duì)胰島素不敏感，同時(shí)給予高熱量飼料喂養(yǎng)，兩者結(jié)合便誘導(dǎo)出病理、生理改變都接近于人類(lèi)2型糖尿病的動(dòng)物模型。

造膜前的喂養(yǎng) ：

     Ⅰ型糖尿病模型成模比較快，通常大鼠在普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)2周后即可開(kāi)始造模

     Ⅱ型糖尿病模型：高脂飲食誘導(dǎo)加小劑量STZ。造模前喂以高脂(高糖)飼料，誘發(fā)出胰島素抵抗。

高脂(高糖)飼料 ：

     高脂(高糖)飼料成分：其中含10蔗糖，10豬油，5膽固醇

     由基礎(chǔ)鼠飼料加蔗糖、煉豬油和蛋黃按比搭配制作高脂高糖飼料：其比例為豬油18 ,蔗糖20 ,蛋黃3 ,基礎(chǔ)飼料59 。

預(yù)實(shí)驗(yàn)的重要性 ：

     很重要。實(shí)驗(yàn)時(shí)STZ的給藥量應(yīng)參照預(yù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，盡量不要盲目按照文獻(xiàn)上或他人的給藥量來(lái)直接使用，鼠均重和空腹(低糖狀態(tài))抗藥力、禁食時(shí)長(zhǎng)、注射選時(shí)、以及之前飼養(yǎng)過(guò)程、測(cè)糖選時(shí)等都不相同，通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定符合自己實(shí)驗(yàn)鼠的給藥計(jì)量，才是*科學(xué)的。

常用給藥劑量 ：

     Ⅰ型糖尿病模型：大鼠劑量為70～65mg/Kg

     Ⅱ型糖尿病模型：高糖高脂喂養(yǎng)1～2 個(gè)月的大鼠,STZ 劑量在25～40mg/Kg

     或參考文獻(xiàn)（鼠均重不同，本劑量以200克均重為例）。

配置STZ液 ：

     檸檬酸緩沖液的配制：

     檸 檬 酸(FW:210.14) 2.1g加入雙蒸水100mL中配成A液

     檸檬酸鈉(FW:294.10)2.94g加入雙蒸水100mL中配成B液

     鏈脲佐菌素配制液：用時(shí)將A、B液按一定比例混合（1：1.32也有按1:1的），PH計(jì)測(cè)定ph值,調(diào)節(jié)ph=4.2-4.5,即是所需配置STZ的檸檬酸緩沖液。

     注射時(shí)用檸檬酸緩沖液以1的濃度溶解STZ，按空腹體重注射相應(yīng)的STZ，  在30分鐘內(nèi)注射完畢。★ STZ容易失活, STZ快速稱(chēng)取后仍要求干燥避光，推薦用干燥鋁箔(或錫箔)紙。

能否使用其他溶液配置緩沖液 ：

     可以。但我們推薦使用檸檬酸。例如用醋酸等溶液，也可以做出，但其PH值不好控制，而STZ只有在PH4.2-4.5的時(shí)候才具有*佳藥力活性。

禁食和血糖的聯(lián)系 ：

     禁食12小時(shí)以上(一般過(guò)夜禁食，不禁水)。禁食的時(shí)間越長(zhǎng)，STZ對(duì)胰島β細(xì)胞的破壞力越明顯，即藥效越高。所以相對(duì)禁食時(shí)間延長(zhǎng)，可以降低STZ的用量。

腹腔注射和尾部注射的區(qū)別 ：

     尾部注射即靜脈注射，**利用率較高，同比腹腔注射，可以節(jié)省藥量，缺點(diǎn)是操作起來(lái)不如腹腔注射方便。

注射前有那些操作步驟？

     過(guò)夜禁食后稱(chēng)重，按大鼠總重量比稱(chēng)取STZ，放一干燥**瓶?jī)?nèi)，外用錫紙包好，將檸檬酸緩沖液及裝STZ的瓶子置冰浴，一起帶到動(dòng)物房，如果注射操作技術(shù)不熟練,應(yīng)兩組交替注射，建議分組溶解STZ，比如10只或15只鼠/組。

注射時(shí)，推進(jìn)速度和血糖的關(guān)系

     推注的速度快，更容易形成高血糖，推注的速度慢，相對(duì)的危險(xiǎn)性較低，但也不容易成模，常規(guī)操作中多要求快速注射。當(dāng)然，STZ的劑量是決定血糖高低的主要因素。

死鼠問(wèn)題的解決

     鼠的個(gè)體差別和空腹(低血糖)抵抗力的差異而致死亡率的不同，開(kāi)始死亡率高可能主要是血糖突然升高,鼠不適應(yīng),或發(fā)生了DKA(即酮癥酸中毒)。

     首先，一定要保證足夠的飲水量(飲水量不足容易導(dǎo)致死鼠);

     其次，高血糖和低血糖都會(huì)造成死鼠，避免死鼠可以通過(guò)注射胰島素或暫時(shí)補(bǔ)糖，兩種途徑： 1、常見(jiàn)為血糖過(guò)高。補(bǔ)胰島素法，補(bǔ)一些中效胰島素。例如給諾和靈n或NPH(中性魚(yú)精蛋白鋅胰島素),每次2--3個(gè)單位,過(guò)了3-5天，大鼠一般死亡率就低了；2、補(bǔ)糖法，禁食后的鼠，注射的時(shí)候已經(jīng)處于低血糖狀態(tài)，造模4小時(shí)后腹腔注射百分之20的葡萄糖，可避免因注射時(shí)血糖過(guò)低死鼠;

     再次，防止動(dòng)物自相殘殺。食物缺乏和供水不足的情況下，會(huì)互相撕殺、啃食同類(lèi),所以食物和飲水要供應(yīng)充足,*好是兩路供應(yīng);

     *后，防止感染。糖尿病大鼠尿量多，墊料潮濕，需要勤換墊料，所以糖尿病大鼠較其他大鼠容易出現(xiàn)感染，特別是泌尿道感染和腹腔感染。腹腔注射、皮下注射及采血測(cè)血糖等侵入性操作前后，要注意**工作。如每次采血測(cè)血糖后可用四環(huán)素(或金霉素眼藥膏)局部涂抹處理傷口預(yù)防感染。

     模型不達(dá)標(biāo)者，三天后補(bǔ)注STZ(以10mg-20mg/kg體重劑量腹腔注射)，也很容易成模，或讓血糖恢復(fù)正常后再常規(guī)劑量注射;但要達(dá)到理想的效果，往往是恢復(fù)到正常狀態(tài)下重新造模。

STZ的保存方法 ：

     2-8℃，干燥避光保存。(注：本品易潮解,如需反復(fù)取量過(guò)程中，應(yīng)避免接觸其受水受潮，受潮后30分鐘后失效，這和注射時(shí)要求其快速注射是一個(gè)道理，即其水溶液不穩(wěn)定）。

多次稱(chēng)取STZ時(shí)的操作方法和注意事項(xiàng)：

     如確實(shí)需要多次稱(chēng)取，要嚴(yán)格按照避免受潮的原則操作和存放。

操作方法：操作環(huán)境、盛裝容器、分裝工具都必須保證干燥。無(wú)需冰浴，分裝后用封口膜密封瓶口，用鋁箔紙(或錫箔，即避光)將瓶子包好，放入干燥罐里（干燥劑，即保持干燥狀態(tài)）， 并2-8℃冷藏，可長(zhǎng)期保存。本品保質(zhì)期為3年半。

     鏈脲佐菌素(Streptozotocin，STZ)對(duì)機(jī)體組織毒性相對(duì)較小，動(dòng)物存活率高，是目前國(guó)內(nèi)外使用較多的制備糖尿病動(dòng)物模型的**。為廣大糖尿病研究人員提供高質(zhì)量、低價(jià)格的-------鏈脲佐菌素產(chǎn)品，使您的研究沒(méi)有后顧之憂(yōu)。

Sigma相關(guān)產(chǎn)品資料：

Sigma  S0130  Streptozocin

≥75% α-anomer basis, ≥98% (HPLC), powder

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