DAPI,DAPI 4',6-Diamidine-2'-phenylindole dihydrochloride,4，6-聯(lián)脒-2-苯基吲哚,4',6-diamidino-2-phenylindol
DAPI
DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)﹐是一種能夠與DNA中大部分A，T堿基相互結(jié)合的熒光染料﹐常用于熒光顯微鏡觀測(cè)。因?yàn)?/span>DAPI可以透過(guò)完整的細(xì)胞膜﹐它可以用于活細(xì)胞和固定細(xì)胞的染色。
在熒光顯微鏡觀察下，DAPI染劑是利用紫外光波長(zhǎng)的光線激發(fā)。當(dāng)DAPI與雙股DNA結(jié)合時(shí)，*大吸收波長(zhǎng)為358nm，*大發(fā)射波長(zhǎng)為461nm，其發(fā)散光的波長(zhǎng)范圍含蓋了藍(lán)色至青綠色。DAPI也可以和RNA結(jié)合，但產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度不及與DNA結(jié)合的結(jié)果，其發(fā)散光的波長(zhǎng)范圍約在400nm左右。
DAPI的發(fā)散光為藍(lán)色，且DAPI和綠色熒光蛋白(Green fluorescent protein, GFP)或Texas Red染劑(紅色熒光染劑)的發(fā)散波長(zhǎng)，僅有少部分重疊，研究員可以善用這項(xiàng)特性在單一的樣品上進(jìn)行多重?zé)晒馊旧?/span>
DAPI能快速進(jìn)入活細(xì)胞中與DNA結(jié)合，因此DAPI對(duì)生物體而言，也被視為一種毒性物質(zhì)與致癌物。使用過(guò)程中應(yīng)注意操作與拋棄的處理程序。
DAPI
中文名：4，6-聯(lián)脒-2-苯基吲哚(?)
英文名：4',6-diamidino-2-phenylindole，2-(4-amidinophenyl)-1H -indole-6-carboxamidine，DAPI dihydrochloride
分子式：C16H15N5
分子量：277.324
CAS number：28718-90-3
光譜性質(zhì)：與雙鏈DNA結(jié)合時(shí)*大吸收/*大發(fā)射為358 nm/461 nm；與RNA結(jié)合時(shí)，*大發(fā)射移動(dòng)到400 nm左右。
染色原理：
DAPI 為一種熒光染料，可以穿透細(xì)胞膜與細(xì)胞核中的雙鏈DNA結(jié)合而發(fā)揮標(biāo)記的作用，可以產(chǎn)生比DAPI自身強(qiáng)20多倍的熒光，和EB相比，對(duì)雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。顯微鏡下可以看到顯藍(lán)色熒光的細(xì)胞，熒光顯微鏡觀察細(xì)胞標(biāo)記的效率高(幾乎為100 %) ，且對(duì)活細(xì)胞無(wú)毒副作用。DAPI染色常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。DAPI也常用于普通的細(xì)胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。細(xì)胞經(jīng)熱激處理后用DAPI染色3分鐘，在熒光顯微鏡下可以看到到細(xì)胞核的形態(tài)變化。
a、 正常的**細(xì)胞核：核形完整，染色質(zhì)均勻。
b、 染色質(zhì)固縮，向外周聚集，形成周邊化。
c、 染色質(zhì)進(jìn)一步固縮，形成很多顆粒物質(zhì)。
d、 細(xì)胞核破裂形成碎片，核解體。
染色步驟：
在細(xì)胞移植前，將DAPI 以一定的濃度加入培養(yǎng)基中，與細(xì)胞共同孵育過(guò)夜，用PBS 緩沖液漂洗至少6 次以洗掉未結(jié)合的DAPI，在用酶消化后離心收集細(xì)胞，加入DMEM 培養(yǎng)基制成細(xì)胞懸液以備用。
存儲(chǔ)條件：-20℃避光保存
注意事項(xiàng)：
1、DAPI強(qiáng)烈致癌，操作時(shí)要戴上手套。
2、貯存液用70%酒精配制，濃度100 µg/ml，可用黑紙包住，長(zhǎng)期凍存。使用液按1:1000用PBS稀釋，*終濃度100 ng/ml。
3、DAPI是非常**的DNA染料，固定過(guò)和沒(méi)有固定過(guò)的活細(xì)胞均可用DAPI染色。
Roche相關(guān)產(chǎn)品信息
Commercial Product Name: DAPI 4',6-Diamidine-2'-phenylindole dihydrochloride
Mat.-No./ Genisys-No.: 10236276001
CAS-No.: 28718-90-3
EINECS-No.: 249-186-7
Molecular formula: C16H17Cl2N5
Molecular Weight: 350.3
Form: solid
Colour: white or yellowish
pH: 4 - 5 10 g/l at 20 °C
Application:DAPI is a fluorescent dye that specifically stains double-stranded DNA and is used for the fluorescence-microscopic detection of mycoplasma in cell culture. Contents:Powder, crystallized, non-sterile
Purity:>90% (from N)
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品名
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產(chǎn)地
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貨號(hào)
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規(guī)格
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單價(jià)
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備注
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DAPI
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Roche
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1E+10
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10mg
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詢價(jià)
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現(xiàn)貨
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