Elisa實驗前樣本提取常識:
—液體類標本
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
——血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
——血漿
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
——尿液
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
樣本離心時注意:一般的不能控制溫度的離心機*好不要用來離心樣本,能控制溫度的離心機調到2-8度就可以了,因為普通離心機離心會對樣品有一定的影響,因為離心機轉子會發熱,如果離心時間不常問題就不大,離心時間過長影響還是蠻大的
理論上提取樣本為每孔10ul,實驗一般檢測損耗大概是一半(也就是說1ml只能用0.5ml),實際每孔上樣50-100ul即可!